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          冷冻与用于IHC福尔马林固定石蜡包埋组织切片

          你在考虑你是免疫组织化学(IHC)的加入到临床前毒理学研究你的设计?集成IHC分子病理学和组织病理学传统以允许测试化合物或细胞靶的可视化 原位。

          IHC适用的是不同的研究需求,其中包括:目标验证,免疫分型,确定微血管密度,肿瘤或其他病变,确定并在动物模型跟踪人类干细胞,和致癌性研究增加细胞增殖的示范,难溶鉴定分化肿瘤,揭示的测试物相关肿瘤的分子特征。 IHC结果可以量化,并使用数字成像软件相比。

          其中第一个决定的作出规划时IHC是组织固定方法。这是IHC应用的最佳原料,冷冻组织或福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织?而超过过去的二十年抗原检索技术发展具有改善的抗体 - 抗原结合和检测在FFPE组织,一些抗原(包括白细胞表面标志某些)不能存活福尔马林固定,石蜡包埋,必须冷冻切片进行评估。  

          用于IHC冷冻组织处理涉及捕捉冷冻新鲜组织,在一个专用的特定介质中嵌入它(十月如)中,用低温恒温器切片它,接着短固定一般用丙酮或乙醇。冷冻组织切片的优点包括抗原的天然蛋白质结构的保留和福尔马林的使用避免,这是一种毒性和致癌化合物。缺点包括组织形态的损失,由于冻结神器的低温恒温器生成的部分,人工和材料的厚度要求当冷冻组织是集合添加您的尸检,蓄冷物流和异戊烷的用于快速冷冻的使用,这是一个有害物质。

          当FFPE组织被用于IHC,10%的标准组织学固定剂的中性缓冲的福尔马林(NBF)是足够的。固定到石蜡包埋时间之前被大大局限于24-48小时一般地,这有助于抗原完整性的保持。的FFPE IHC优点部分包括优良的组织形态和易于掺入到常规组织收集,处理和存储。的主要缺点是蛋白质的交联,而这往往与一个简短热,化学或酶基抗原检索步骤被颠倒。

          已被证明与FFPE组织从体育外围中使用的物质反应的市售抗体的数量正在迅速扩大。用于IHC使用FFPE组织的提供最佳组织形态,靶抗原位置内组织和细胞的有利于鉴定。一起随着易于集成到常规组织处理,选择这些优点证明在抗原 - 抗体结合不被排除过程中哪些应用程序使用FFPE组织。

          理想情况下,你应该为IHC组织收集计划之前固定液建立适当的选择和时机。决定你想在哪一个组织(一个或多个)可视化,研究现有的抗体,并检查固定方法成功用于已与您所选择的抗体什么样的目标(S)。当抗体已-被成功冻结和FFPE组织所用的两个,我们建议FFPE方法。

          记住,无论哪个固定技术的使用,就必须往该被收集和固定或死后冷冻排除感兴趣的抗原的快速自溶破坏IHC组织。更好的组织质量,更清晰的结果将是!

          在HSRL与我们联系 IHC讨论如何临床前毒理学研究你的利益。

           

          HSRL Specializes in 组织病理学 & Specimen Storage 服务

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